为了从动物组织中提取纯净的DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本,并提取猪的DNA.实验步骤如下:
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化24h。
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液抽提。
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴。
④加酸酸钠和无水乙醇,4000r/min高速离心15min。
⑤用70%乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的DNA。
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜。
(2)步骤②的目的是使蛋白质变性,抽提蛋白质使蛋白质变性,抽提蛋白质。步骤③的目的是水解RNA水解RNA。
(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是析出DNA,提取含杂质较少的DNA析出DNA,提取含杂质较少的DNA,高速离心时温度保持在4℃的原因有降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子运动,易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韧性,减少断裂)降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子运动,易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韧性,减少断裂)。
(4)若是从血细胞中提取DNA,则选择鸡血鸡血(选填“鸡血”或“哺乳动物红细胞”)。破碎细胞时,向血细胞液中加入一定量的蒸馏水蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。
【考点】酶的特性及应用.
【答案】洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜;使蛋白质变性,抽提蛋白质;水解RNA;析出DNA,提取含杂质较少的DNA;降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子运动,易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韧性,减少断裂);鸡血;蒸馏水
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:13引用:2难度:0.6