泡膜运输是介导真核细胞蛋白质分泌途径的主要方式。科学家已经成功鉴定出三种运输小泡：网格蛋白有被小泡，COPⅠ有被小泡和COPⅡ有被小泡。其中COPⅠ有被小泡上的ε-COP蛋白在高尔基体内部以及高尔基体与内质网之间的蛋白质运输中发挥了关键作用。科学家通过一定的技术手段，制备了水稻ε-COP蛋白的单克隆抗体。
（1）利用PCR技术扩增水稻ε-COP蛋白基因，PCR反应需在一定的缓冲溶液中才能进行，主要成分包括：DNA模板、2种引物2种引物，4种脱氧核苷酸和TaqDNA聚合酶TaqDNA聚合酶。
（2）研究人员通过一定的技术手段，将ε-COP蛋白基因与运载体结合，得到如图所示重组表达载体，据图分析：
①该重组表达载体用到的限制酶是BamHI和XhoIBamHI和XhoI。研究人员将其导入大肠杆菌常用方法是CaCl2转化法CaCl2转化法。
②接下来研究人员将转化后的大肠杆菌接种在含有氨苄青霉素（Amp）氨苄青霉素（Amp）的培养基中培养一段时间，长出的菌落即为转化成功的大肠杆菌。
③研究人员以大肠杆菌作为受体细胞，相对酵母菌而言，具有结构简单、繁殖快、易培养、遗传物质相对较少、外源蛋白表达量高结构简单、繁殖快、易培养、遗传物质相对较少、外源蛋白表达量高（答出两点即可）等优点。
（3）利用聚丙烯酰胺凝胶电泳将重组水稻ε-COP蛋白提纯后，取适量重组蛋白分多次皮下注射家兔，10天后大量采血收集抗血清。注射的重组蛋白相当于抗原抗原，多次注射的目的是：产生大量的浆细胞，分泌更多抗体产生大量的浆细胞，分泌更多抗体。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】2种引物；TaqDNA聚合酶；BamHI和XhoI；CaCl2转化法；氨苄青霉素（Amp）；结构简单、繁殖快、易培养、遗传物质相对较少、外源蛋白表达量高；抗原；产生大量的浆细胞，分泌更多抗体
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：12引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
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