下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题。
（1）图1所示的质粒分子经 SmaⅠ切割前后，分别含有 00，22个游离的磷酸基团。
SmaⅠ切割断裂 磷酸二酯磷酸二酯键，形成的末端与 EcoRⅠ形成的 不相同不相同（相同/不相同）
（2）若对图中质粒进行改造，插入的 SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 高高。
（3）用图中的质粒和外源 DNA构建重组质粒，不能使用 SmaⅠ切割，原因是 SmaⅠ会破坏质粒的抗生素抗性基因、外源DNA中的目的基因SmaⅠ会破坏质粒的抗生素抗性基因、外源DNA中的目的基因。
（4）与只使用 EcoRⅠ相比较，使用 BamHⅠ和 HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源 DNA 的优点在于可以防止 质粒和目的其因自身环化或目的基因与载体反向连接质粒和目的其因自身环化或目的基因与载体反向连接。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 DNA连接DNA连接酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 便于鉴别和筛选含有目的基因的细胞便于鉴别和筛选含有目的基因的细胞。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】0；2；磷酸二酯；不相同；高；SmaⅠ会破坏质粒的抗生素抗性基因、外源DNA中的目的基因；质粒和目的其因自身环化或目的基因与载体反向连接；DNA连接；便于鉴别和筛选含有目的基因的细胞
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：26引用：1难度：0.7
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
