近期冷泉港实验室专门为城市农业培育了像葡萄一样的小番茄，这种小番茄也适合在太空种植。科学家利用基因突变将控制生长的终止基因（SP）改造为SP1基因，利用基因敲除（将同源DNA片段导入受体细胞，使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段）的方法使小番茄的成熟期缩短为40天。如图为SP基因两端的序列和质粒中相关的序列，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC。
回答下列问题：
（1）除限制酶以外，基因工程中常用的工具还有DNA连接酶、运载体DNA连接酶、运载体。在上述实例中，为了便于重组和筛选，需使用限制酶Ⅱ和限制酶Ⅰ限制酶Ⅱ和限制酶Ⅰ分别切割目的基因和质粒。质粒中标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（2）利用物理因素和化学因素处理SP基因可诱发SP基因突变诱发SP基因突变，使筛选出SP1基因的概率增大。可利用PCRPCR技术扩增SP1基因，将搭载SP1基因的重组质粒导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基困枪法、花粉管通道法农杆菌转化法、基困枪法、花粉管通道法（答出两种）。
（3）利用SP1基因敲除SP基因属于生物变异中的基因重组基因重组，SP1基因成功表达的个体生物学水平鉴定标准为小番茄的成熟期约为40天小番茄的成熟期约为40天。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA连接酶、运载体；限制酶Ⅱ和限制酶Ⅰ；鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；诱发SP基因突变；PCR；农杆菌转化法、基困枪法、花粉管通道法；基因重组；小番茄的成熟期约为40天
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：3引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
