某研究小组欲将已知抗除草剂基因导入原生质体培育抗除草剂大豆.请回答下列问题:
(1)为获得大量抗除草剂基因,可通过 PCRPCR技术进行扩增,也可将其连接到 质粒质粒上,通过大肠杆菌培养扩增.
(2)制备叶片原生质体的酶混合液中,一般含较高浓度的甘露醇,其目的是避免制备的原生质体 吸水涨破吸水涨破.无菌原生质体的制备过程中,整个无菌操作过程需在 超净台超净台中进行.
(3)可通过 显微注射显微注射方法,直接将抗除草剂基因导入原生质体的细胞核.此外,还可用 聚乙二醇聚乙二醇融合、电击等方法导入.导入后的原生质体需再生出 细胞壁细胞壁,经持续分裂获得愈伤组织,进一步分化获得再生植株并扩大繁殖.
(4)利用带有标记的抗除草剂基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行 分子杂交分子杂交,验证抗除草剂基因是否被整合到受体的细胞中并转录.
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】PCR;质粒;吸水涨破;超净台;显微注射;聚乙二醇;细胞壁;分子杂交
【解答】
【点评】
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