人血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大，通常从人血液中提取，但提取量有限，因此科学家利用基因工程和胚胎工程等技术培育转HSA基因牛，该种牛能生产含HSA的牛乳，如图是培育流程图，据图回答下列问题：
（1）图中过程①需要用逆转录逆转录 酶最终得到双链DNA分子；该DNA分子往往需要经过PCR扩增。为了能与酶切后的质粒进行连接，需要在扩增前设计的引物上添加限制性核酸内切酶酶切位点（酶切位点）限制性核酸内切酶酶切位点（酶切位点）。
（2）过程②是基因工程的核心步骤，为了提高该过程的连接成功率，除了要考虑温度等环境因素外，还应考虑目的基因的浓度和质量、质粒的浓度和质量、DNA连接酶的浓度和活性目的基因的浓度和质量、质粒的浓度和质量、DNA连接酶的浓度和活性（至少写2点）因素。
（3）若过程③选用牛胚胎干细胞作为受体细胞，则过程④利用的技术有核移植、胚胎体外培养核移植、胚胎体外培养，若将上述重组胚胎干细胞直接注入囊胚期的内细胞团，不一定不一定（填“一定不”、“不一定”或“一定”）能得到产生含HSA牛乳的转基因牛，原因是注入的重组胚胎干细胞不一定分裂、分化形成乳腺组织注入的重组胚胎干细胞不一定分裂、分化形成乳腺组织。
（4）若过程③选用受精卵作为受体细胞，则在进行过程⑤之前，需要对早期胚胎细胞进行DNA分析和性别鉴定性别鉴定；若在转基因母牛的牛乳中检测到HSA（或人血清白蛋白）HSA（或人血清白蛋白），说明HSA基因成功表达。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；限制性核酸内切酶酶切位点（酶切位点）；目的基因的浓度和质量、质粒的浓度和质量、DNA连接酶的浓度和活性；核移植、胚胎体外培养；不一定；注入的重组胚胎干细胞不一定分裂、分化形成乳腺组织；性别鉴定；HSA（或人血清白蛋白）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：15引用：1难度：0.7
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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