非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒（ASFV）感染家猪和各种野猪引起的一种急性、出血性、烈性传染病，被称作养猪业的“头号杀手”。某科研小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪细胞中，利用核移植技术培育转基因猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体。其流程图如图所示。
（1）体外获得大量的ASFV外壳蛋白基因可采用PCR技术，其原理是：体内DNA复制的原理体内DNA复制的原理。进行PCR时需设计两种引物，其原因是DNA复制时两条链均作为模板链DNA复制时两条链均作为模板链。
（2）图中体外采集的卵母细胞需培养至减II中期（MII中期）减II中期（MII中期）时期，将卵母细胞去核的目的是保证重组细胞中的核基因只来自基因改造后的B猪的细胞核保证重组细胞中的核基因只来自基因改造后的B猪的细胞核。
（3）从B猪体内取组织块剪碎后用胰蛋白酶胰蛋白酶处理制成单细胞悬液后通过基因改造、核移植技术获得重组细胞，再将重组细胞放入含5% CO2的培养箱中，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH值稳定维持培养液的pH值稳定。培养重组细胞的培养液中，还需要添加血清或血浆血清或血浆等天然成分。
（4）为了检测转基因的D猪是否产生相应抗体，应采用的检测方法是抗原一抗体杂交抗原一抗体杂交。
【考点】动物细胞核移植技术；动物细胞培养的条件与过程．
【答案】体内DNA复制的原理；DNA复制时两条链均作为模板链；减II中期（MII中期）；保证重组细胞中的核基因只来自基因改造后的B猪的细胞核；胰蛋白酶；维持培养液的pH值稳定；血清或血浆；抗原一抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：14引用：1难度：0.7
