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基因工程中,GUS基因编码的酶可将无色底物生成蓝色产物,GFP基因会产生绿色荧光蛋白,这两种基因都可作为标记基因来研究发育生物学的问题。利用双CRISPR/Cas9系统和Cre/loxP重组酶系统技术可更好地实现该研究。请据图作答:

(1)图1为双CRISPR/Cas9系统作用示意图。该系统能够特异性识别DNA序列并切割特定位点的原因分别是
向导RNA能识别特定序列
向导RNA能识别特定序列
Cas9蛋白能定点切割DNA序列
Cas9蛋白能定点切割DNA序列
。图中向导RNA与DNA结合的原理是
碱基互补配对
碱基互补配对
。将删除区切割后,转入基因与原DNA片段可通过形成
磷酸二酯键
磷酸二酯键
拼接起来,形成新的DNA序列。
(2)双CRISPR/Cas9系统可直接在靶细胞内起作用,与传统的基因工程相比,该操作无需
载体(运载体)
载体(运载体)
(填写工具)。与质粒载体导入外源基因比,双CRISPR/Cas9系统编辑的基因可以不含
启动子、终止子和标记基因
启动子、终止子和标记基因

(3)图2为Cre/loxP重组酶系统作用示意图。利用双CRISPR/Cas9系统可精准地将loxP序列、GUS基因及GFP基因连接,接上35S启动子之后可在组织中检测出蓝色区而无绿色荧光区,这是由于
GFP
GFP
基因自身无启动子而无法表达。Cre基因是重组酶基因,经38℃热处理后可被激活表达,在此前提下组织中可检测出绿色荧光区,据此分析绿色荧光区形成的原因是
重组酶能(特异性识别并)切割loxP序列,使GFP基因得以表达
重组酶能(特异性识别并)切割loxP序列,使GFP基因得以表达
。采用
延长热处理时间
延长热处理时间
等技术手段可以扩大组织中绿色荧光区的面积。

【答案】向导RNA能识别特定序列;Cas9蛋白能定点切割DNA序列;碱基互补配对;磷酸二酯键;载体(运载体);启动子、终止子和标记基因;GFP;重组酶能(特异性识别并)切割loxP序列,使GFP基因得以表达;延长热处理时间
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:29引用:2难度:0.5
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    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

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    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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