基因工程中,GUS基因编码的酶可将无色底物生成蓝色产物,GFP基因会产生绿色荧光蛋白,这两种基因都可作为标记基因来研究发育生物学的问题。利用双CRISPR/Cas9系统和Cre/loxP重组酶系统技术可更好地实现该研究。请据图作答:

(1)图1为双CRISPR/Cas9系统作用示意图。该系统能够特异性识别DNA序列并切割特定位点的原因分别是向导RNA能识别特定序列向导RNA能识别特定序列、Cas9蛋白能定点切割DNA序列Cas9蛋白能定点切割DNA序列。图中向导RNA与DNA结合的原理是碱基互补配对碱基互补配对。将删除区切割后,转入基因与原DNA片段可通过形成磷酸二酯键磷酸二酯键拼接起来,形成新的DNA序列。
(2)双CRISPR/Cas9系统可直接在靶细胞内起作用,与传统的基因工程相比,该操作无需载体(运载体)载体(运载体)(填写工具)。与质粒载体导入外源基因比,双CRISPR/Cas9系统编辑的基因可以不含启动子、终止子和标记基因启动子、终止子和标记基因。
(3)图2为Cre/loxP重组酶系统作用示意图。利用双CRISPR/Cas9系统可精准地将loxP序列、GUS基因及GFP基因连接,接上35S启动子之后可在组织中检测出蓝色区而无绿色荧光区,这是由于GFPGFP基因自身无启动子而无法表达。Cre基因是重组酶基因,经38℃热处理后可被激活表达,在此前提下组织中可检测出绿色荧光区,据此分析绿色荧光区形成的原因是重组酶能(特异性识别并)切割loxP序列,使GFP基因得以表达重组酶能(特异性识别并)切割loxP序列,使GFP基因得以表达。采用延长热处理时间延长热处理时间等技术手段可以扩大组织中绿色荧光区的面积。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】向导RNA能识别特定序列;Cas9蛋白能定点切割DNA序列;碱基互补配对;磷酸二酯键;载体(运载体);启动子、终止子和标记基因;GFP;重组酶能(特异性识别并)切割loxP序列,使GFP基因得以表达;延长热处理时间
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:29引用:2难度:0.5
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