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嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
(1)PCR扩增bglB基因时,选用
嗜热土壤芽孢杆菌
嗜热土壤芽孢杆菌
基因组DNA作模板.
(2)图1为质粒限制酶酶切图谱.bglB基因不含图中限制酶识别序列.为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入
NdeⅠ
NdeⅠ
BamHⅠ
BamHⅠ
不同限制酶的识别序列.
(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为
转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶
转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶

Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

(4)据图2、3可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会
失活
失活
;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在
B
B
(单选).
A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率.经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因.
(5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽孢杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中
A、C
A、C
(多选).
A.仅针对bglB基因进行诱变     B.bglB基因产生了定向突变
C.bglB基因可快速累积突变    D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变.

【答案】嗜热土壤芽孢杆菌;NdeⅠ;BamHⅠ;转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶;失活;B;A、C
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:667引用:18难度:0.5
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    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

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    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

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