葡激酶（SAK）是由金黄色葡萄球菌分泌的一种纤溶酶原激活物，它可以激活人体中的血纤维蛋白溶酶原形成血纤维蛋白溶酶，从而溶解血栓。研究人员尝试将SAK基因导入到番茄中，利用转基因番茄生产有生物学活性的SAK．回答下列问题：
（1）目的基因可从基因文库中获取，与基因组文库相比，cDNA文库具有的特点：cDNA文库比较小，无启动子和内含子，只含部分基因，物种间可进行基因交流cDNA文库比较小，无启动子和内含子，只含部分基因，物种间可进行基因交流（答出两点）。利用PCR技术扩增目的基因时需要两种引物，原因是 DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时扩增DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时扩增。
（2）构建基因表达载体时，常使用两种不同的限制酶分别切割目的基因和Ti质粒，该过程不使用同一种限制酶的原因是 防止质粒自身环化、保证目的基因与Ti质粒正确连接防止质粒自身环化、保证目的基因与Ti质粒正确连接。
（3）含有SAK基因的表达载体构建成功后，接下来依次完成 将表达载体转入农杆菌将表达载体转入农杆菌、将含有Ti质粒的农杆菌导入植物细胞将含有Ti质粒的农杆菌导入植物细胞和 将导入成功的植物细胞进行组织培养将导入成功的植物细胞进行组织培养等步骤才能获得转基因植株。检测转基因植株中的SAK基因是否表达成功，通常采用的方法是 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】cDNA文库比较小，无启动子和内含子，只含部分基因，物种间可进行基因交流；DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时扩增；防止质粒自身环化、保证目的基因与Ti质粒正确连接；将表达载体转入农杆菌；将含有Ti质粒的农杆菌导入植物细胞；将导入成功的植物细胞进行组织培养；抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：10引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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