2020 年诺贝尔生理学或医学奖的获奖成果为丙肝病毒(HCV)的发现过程。某研究小组欲探究 HCV 入侵时间对肝细胞活力的影响,请根据提供的实验材料和仪器完成实验思路,并回答相关问题。
材料与用具:人体肝组织、新分离的HCV株(RNA病毒)、胎牛血清、动物细胞培养液、胰蛋白酶、培养瓶、相关检测仪器等。
(要求与说明:检测时间间隔12小时,保证48小时内悬浮培养的营养条件适宜,不出现接触抑制,实验仪器、试剂等操作不做要求,细胞活力的检测方法不做要求)
(1)实验思路:
①将人体肝细胞培养在添加了胎牛血清的动物细胞培养液中,当细胞处于快速增长期时,用胰蛋白酶将细胞分散并悬浮培养将人体肝细胞培养在添加了胎牛血清的动物细胞培养液中,当细胞处于快速增长期时,用胰蛋白酶将细胞分散并悬浮培养;
②将肝细胞悬液均等加入若培养瓶中,将培养瓶均分为甲乙两组,检测细胞活力,并记录将培养瓶均分为甲乙两组,检测细胞活力,并记录;
③甲组用适量且等量新分离HCV感染肝细胞,乙组不作处理;
④在适宜条件下培养分别在12小时,24小时,36小时,48小时检测细胞活力,记录分别在12小时,24小时,36小时,48小时检测细胞活力,记录,统计分析数据。
(2)预测最可能的实验结果。(用曲线图表示,坐标轴上标出初始值)
(3)分析与讨论:
①胰蛋白酶可以分散细胞获得单个细胞的悬浮液的原因是:胰蛋白酶可消化组织中的胶原纤维和细胞外其他成分胰蛋白酶可消化组织中的胶原纤维和细胞外其他成分。
②HCV进入肝细胞后,人体T淋巴细胞主要是通过其表面的抗原-MHC复合体受体抗原-MHC复合体受体来识别已被感染的肝细胞。
HCV感染可引起丙肝,丙肝可能进一步发展成肝癌,正常细胞癌变的根本原因是基因突变基因突变。
③HCV主要通过血液传播、性传播、母婴传播,特别是感染HIV的个体免疫功能减退,感染HCV的风险更高,原因是:主要感染辅助性T淋巴细胞,也可感染脑细胞,巨噬细胞等,个体的免疫功能严重衰退主要感染辅助性T淋巴细胞,也可感染脑细胞,巨噬细胞等,个体的免疫功能严重衰退。
④若某地出现HCV感染疫情,请用相应的生物学知识提出可行的检测初期感染者的方法:检测HCV相关的核酸片段,或者逆转录后进行检测HCV相关的核酸片段,或者逆转录后进行。(仅写出检测方法,具体操作不做要求;感染HCV后,丙肝抗体在血浆中检出的时间较晚,一般要8-12周)
【考点】动物细胞培养的条件与过程;艾滋病的传染与预防.
【答案】将人体肝细胞培养在添加了胎牛血清的动物细胞培养液中,当细胞处于快速增长期时,用胰蛋白酶将细胞分散并悬浮培养;将培养瓶均分为甲乙两组,检测细胞活力,并记录;分别在12小时,24小时,36小时,48小时检测细胞活力,记录;胰蛋白酶可消化组织中的胶原纤维和细胞外其他成分;抗原-MHC复合体受体;基因突变;主要感染辅助性T淋巴细胞,也可感染脑细胞,巨噬细胞等,个体的免疫功能严重衰退;检测HCV相关的核酸片段,或者逆转录后进行
【解答】
【点评】
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