径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到棉花细胞内,获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶,图中箭头所指为三种限制酶的切点;图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图;图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请分析回答问题:

(1)将径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存,再根据TaNHX2基因的特定序列从中提取图1所示DNA片段,该获取目的基因的方法为从基因文库中获取从基因文库中获取。
(2)不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA,其原因是基因的选择性表达(或径柳匙叶草根尖分生区细胞中TaNHX2基因不能表达)基因的选择性表达(或径柳匙叶草根尖分生区细胞中TaNHX2基因不能表达)。
(3)若用BamHⅠ切割图1所示的DNA片段,获得目的基因,则需选用Sau3AⅠSau3AⅠ切割图3所示质粒,以便构建基因表达载体,该方案的缺陷是出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定。故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选用EcoRⅠ和BamHⅠEcoRⅠ和BamHⅠ酶。
(4)用上述最佳方案构建基因表达载体,所得重组质粒不一定能不一定能(选填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。
(5)图3中,质粒上的抗生素抗性基因的作用是以便筛选出含有目的基因的受体细胞以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
(6)为了检测技术成果,科研工作者在个体水平的检测方法是将转基因棉花种植在盐碱地,观察其生长状况将转基因棉花种植在盐碱地,观察其生长状况。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】从基因文库中获取;基因的选择性表达(或径柳匙叶草根尖分生区细胞中TaNHX2基因不能表达);Sau3AⅠ;出现目的基因和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确定;EcoRⅠ和BamHⅠ;不一定能;以便筛选出含有目的基因的受体细胞;将转基因棉花种植在盐碱地,观察其生长状况
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:55引用:4难度:0.7
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