黄萎病是危害棉花种植的常见疾病，其病原菌主要为大丽轮枝菌和黑白轮枝菌。科学家通过基因工程技术将抗黄萎病基因D导入棉花，获得抗黄萎病棉花。图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，BclⅠ、HindⅢ和BamHⅠ为限制酶。请回答下列问题：
（1）获得碱基序列未知的基因D的方法一般为 从DNA文库中获取从DNA文库中获取。利用PCR技术扩增基因D时，设计引物序列的主要依据是 与D基因两端的部分核苷酸序列碱基互补配对与D基因两端的部分核苷酸序列碱基互补配对。
（2）将目的基因D和Ti质粒连接构建重组质粒时，切割Ti质粒应选用的限制酶是 HindⅢ和BamHⅠHindⅢ和BamHⅠ，原因是 双酶切产生不同的黏性末端，防止自身环化和倒接，保证了目的基因准确插入到T-DNA内部双酶切产生不同的黏性末端，防止自身环化和倒接，保证了目的基因准确插入到T-DNA内部；可利用含 氨苄青霉素氨苄青霉素的培养基对导入重组质粒的农杆菌进行筛选。
（3）农杆菌能够感染棉花的愈伤组织细胞，与这些细胞可以分泌大量的 酚类化合物酚类化合物有关。种植抗黄萎病棉花在环境保护方面的意义主要表现在 减少化学农药的用量，减少环境污染和对人类的危害，对保护环境有益减少化学农药的用量，减少环境污染和对人类的危害，对保护环境有益。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】从DNA文库中获取；与D基因两端的部分核苷酸序列碱基互补配对；HindⅢ和BamHⅠ；双酶切产生不同的黏性末端，防止自身环化和倒接，保证了目的基因准确插入到T-DNA内部；氨苄青霉素；酚类化合物；减少化学农药的用量，减少环境污染和对人类的危害，对保护环境有益
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：11引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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