Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的

细胞核

细胞核

。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到

囊胚

囊胚

期时，可从

内细胞团

内细胞团

分离出ES细胞。
（3）步骤③中，需要构建含有基因Rag₂的表达载体。可以利用

PCR技术

PCR技术

扩增Rag₂基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有

HindⅢ

HindⅢ

和

PstⅠ

PstⅠ

的酶切位点。
（4）为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的

蛋白质

蛋白质

，用

抗Rag₂蛋白的抗体

抗Rag₂蛋白的抗体

进行杂交实验。