植物基因工程可以改造农作物性状，使农作物变得更加高产，以养活众多的人口。如图是培育良种水稻的有关原理和步骤。
（1）在某水稻近源杂草基因组中定位了一个目的基因（抗虫基因），其碱基序列未知，但已知其前后临近区域的两段DNA序列，若将含有目的基因的DNA片段克隆出来，可以利用 已知其临近区域的前后两段DNA序列已知其临近区域的前后两段DNA序列设计引物，反应体系中除含缓冲液外，还应该包括 模板DNA、耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、引物模板DNA、耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、引物。
（2）为防止酶切产物自身环化，①过程需用两种限制酶，两种限制酶选择的原则是 酶切后形成的黏性末端序列不相同酶切后形成的黏性末端序列不相同，②过程筛选出符合条件的农杆菌的方法 用含有四环素的培养基培养农杆菌，存活下来的农杆菌即符合条件用含有四环素的培养基培养农杆菌，存活下来的农杆菌即符合条件。
（3）③过程发生的转化过程是 农杆菌侵染愈伤组织细胞，使目的基因随着T—DNA转移到被侵染的细胞中，并且将其整合到该细胞的染色体上农杆菌侵染愈伤组织细胞，使目的基因随着T—DNA转移到被侵染的细胞中，并且将其整合到该细胞的染色体上，筛选出符合要求的愈伤组织细胞的方法是 用含有除草剂的培养基培养愈伤组织细胞用含有除草剂的培养基培养愈伤组织细胞。
（4）④过程的原理是 细胞的全能性细胞的全能性，该过程发生了细胞的 再分化再分化（填“脱分化”或“再分化”）。
（5）⑤过程最直接的鉴定筛选方法是 观察水稻植株是否抗虫（与普水稻相比，转基因水稻植株是否抗虫）观察水稻植株是否抗虫（与普水稻相比，转基因水稻植株是否抗虫）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】已知其临近区域的前后两段DNA序列；模板DNA、耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、引物；酶切后形成的黏性末端序列不相同；用含有四环素的培养基培养农杆菌，存活下来的农杆菌即符合条件；农杆菌侵染愈伤组织细胞，使目的基因随着T—DNA转移到被侵染的细胞中，并且将其整合到该细胞的染色体上；用含有除草剂的培养基培养愈伤组织细胞；细胞的全能性；再分化；观察水稻植株是否抗虫（与普水稻相比，转基因水稻植株是否抗虫）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：7引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
