普通棉花中含β甘露糖苷酶基因（GhMmaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β甘露糖苷酶催化半纤维素降解．棉纤维长度变短。科研人员通过构建反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如图：
（1）基因表达载体除图示组成外，还有复制原点、终止子、标记基因终止子、标记基因等（答两个）。①②过程中所用的限制酶分别是 HindⅢ和BamHⅠHindⅢ和BamHⅠ和 SmaⅠSmaⅠ。
（2）PCR技术扩增β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）原理是 DNA复制DNA复制，该过程需要根据GhMnaA2基因设计 22种引物，为保证 GhMnaA2插入到质粒2中，需在引物的 5′5′端添加限制酶识别序列。
（3）③过程中用酶切法可鉴定正、反义基因表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切割正义基因表达载体获得0.1kb、3.75kb、5.25kb、8.6kb四种长度的DNA片段，则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是 5.35kb5.35kb和 12.35kb12.35kb。
（4）导入细胞内的反义GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纤维更长的原理是 由于反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达（翻译），故导入细胞内的反义GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纤维更长由于反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达（翻译），故导入细胞内的反义GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纤维更长。
（5）为什么不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞？因为棉花细胞中本来就有GhMna2，不管是否导入都能与该探针发生碱基互补配对，故不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞因为棉花细胞中本来就有GhMna2，不管是否导入都能与该探针发生碱基互补配对，故不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】终止子、标记基因；HindⅢ和BamHⅠ；SmaⅠ；DNA复制；2；5′；5.35kb；12.35kb；由于反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达（翻译），故导入细胞内的反义GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纤维更长；因为棉花细胞中本来就有GhMna2，不管是否导入都能与该探针发生碱基互补配对，故不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：67引用：1难度：0.7
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（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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