嗜热土壤微生物A菌能产生一种具有耐热性能的纤维素酶（简称“B酶”），为使大肠杆菌具备降解纤维素的能力，更好的用于生产实践，开展相关实验研究。回答下列问题：
（1）为获取B酶基因，除PCR扩增外；常用的方法还有 从基因文库中获取、化学方法人工合成从基因文库中获取、化学方法人工合成（回答2点）。
（2）利用PCR扩增B酶基因依据的原理是 DNA半保留复制的原理DNA半保留复制的原理。
（3）上图为质粒限制酶酶切图谱，而B酶基因不含图中限制酶的识别序列。为使PCR扩增的B酶基因重组进该质粒，扩增的B酶基因两端需分别引入 NdeI和BamHINdeI和BamHI不同限制酶的识别序列。
（4）转基因大肠杆菌成功获得了降解纤维素的能力，研究人员通过 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交的方法来确定转基因大肠杆菌细胞内产生了B酶。进一步研究发现，与B酶相比，转基因大肠杆菌降解纤维素的效率较低，试分析可能的原因是 转基因大肠杆菌内B酶的作用条件不适宜，B酶活性降低；转基因大肠杆菌内B酶基因表达的量减少，B酶含量降低转基因大肠杆菌内B酶的作用条件不适宜，B酶活性降低；转基因大肠杆菌内B酶基因表达的量减少，B酶含量降低（回答2点）。
（5）本研究成功应用于新农村建设中的秸秆处理，与传统秸秆焚烧相比，其优点有 减少环境污染；实现分解产物的再利用，提高经济效益；实现能量的多级利用，提高能量的利用率减少环境污染；实现分解产物的再利用，提高经济效益；实现能量的多级利用，提高能量的利用率（回答2点）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】从基因文库中获取、化学方法人工合成；DNA半保留复制的原理；NdeI和BamHI；抗原-抗体杂交；转基因大肠杆菌内B酶的作用条件不适宜，B酶活性降低；转基因大肠杆菌内B酶基因表达的量减少，B酶含量降低；减少环境污染；实现分解产物的再利用，提高经济效益；实现能量的多级利用，提高能量的利用率
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：12引用：3难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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