酱油作为生活中常用的调味剂，距今已经有几千年的历史。酱油的风味受到多种因素的影响，其中发酵过程中微生物的生物化学反应对各类风味活性物质的生成具有重要作用。对酱油发酵过程的研究表明发酵前期曲霉占主导地位，后期则以酵母菌群为主。现有一实验小组想从酱油的酱渣中筛选细菌并确定其种类，实验步骤如下：
①称取2.5 g酱渣到无菌采样袋中，加入22.5 mL无菌水振荡15min,在此基础上，进一步稀释10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶倍。
②取稀释10⁶倍后的菌悬液0.1mL，涂布到牛肉音蛋白胨培养基上，一组在37℃下培养48 h,另一组在培养基表面覆盖液体石蜡并在相同条件下培养。
③待长出菌落后选取典型菌落进行划线分离和纯化镜检，并进行保藏。请回答下列问题：
（1）本实验步骤①②中培养并分离酱油中的细菌采用的接种方法为

稀释涂布平板法

稀释涂布平板法

。
（2）在步骤②中，另一组培养基表面覆盖液体石蜡是为了

隔绝空气，筛选厌氧菌

隔绝空气，筛选厌氧菌

。培养48h再观察的原因是防止因培养时间不足而导致

遗漏菌落数目

遗漏菌落数目

。
（3）待长出菌落后，可以通过观察菌落的

大小、形状、颜色、隆起程度

大小、形状、颜色、隆起程度

（答出两点即可）等方面的特征来进行细菌的区分和鉴定。结果表明在酱油中能检出的细菌有芽孢杆菌、葡萄球菌、四联球菌等，其中芽孢杆菌能够产生蛋白酶，将蛋白质分解为

小分子肽和氨基酸

小分子肽和氨基酸

，为酱油增加独特的口感。葡萄球菌可以产生有机酸，降低酱油pH，在发酵后期主要为

酵母菌

酵母菌

的后续生长与发酵提供适宜的环境。
（4）为了临时保藏分离出来的菌种，我们可以将它接种到

固体斜面

固体斜面

培养基上，但是此方法保存的时间不长，菌种容易

被污染或者产生变异

被污染或者产生变异

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