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Ⅰ．随着基因工程的发展，人类利用羊细胞生物获得新的生物产量越来越广泛，近年来，研究人员发现莱茵衣藻在这方面也有不错的发展前景．莱茵衣藻是羊细胞真核绿藻，它是目前唯一能特异性地对细胞核、叶绿体和线粒体基因组进行遗传转化的真核生物．
（1）培养衣藻菌一定光照、从衣藻的代谢类型方面考虑，在其培养基中不需加入碳源碳源营养成分，培养过程中还需要进行振荡，其目的是让衣藻与二氧化碳、培养液充分混匀让衣藻与二氧化碳、培养液充分混匀．
（2）有研究者发现振荡培养会影响转化效率，他设计实验探究振荡时间与衣藻转化效率的关系，结果如图所示：
该研究结果可说明随着振荡时间的增加，衣藻转化效率先增加再降低，在3D时，转化效率最高随着振荡时间的增加，衣藻转化效率先增加再降低，在3D时，转化效率最高．
（3）基因工程中用衣藻作为受体细胞的优势是繁殖快、单细胞、易培养繁殖快、单细胞、易培养．衣藻转化的原理是可以对真核生物的蛋白质进行加工可以对真核生物的蛋白质进行加工当转化的DNA分子通过核孔核孔进入细胞核中时，乙随机和非同源方式整合到细胞核基因组的不同位点，该过程有限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶的参与．
Ⅱ．如表中列出了几种限制酶识别系列及其切割位点，请回答下列问题：
| 限制酶 | EamHⅠ | HtndⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
| 识别序列及切割位点 |  |  |  |  |
（4）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有
0、2
0、2
个游离的磷酸基团．（5）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止
质粒和含有目的基因的外源DNA片段自身环化
质粒和含有目的基因的外源DNA片段自身环化
．（6）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在
以蔗糖为唯一碳源
以蔗糖为唯一碳源
的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测．【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】碳源；让衣藻与二氧化碳、培养液充分混匀；随着振荡时间的增加，衣藻转化效率先增加再降低，在3D时，转化效率最高；繁殖快、单细胞、易培养；可以对真核生物的蛋白质进行加工；核孔；限制酶和DNA连接酶；0、2；质粒和含有目的基因的外源DNA片段自身环化；以蔗糖为唯一碳源
【解答】
【点评】
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发布：2024/12/29 8:0:2组卷：26引用：1难度：0.1
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
