鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。如图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①-④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
| 限制酶 | 识别序列和切割位点 |
| EcoRⅠ |  |
| BamHⅠ |
|
鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列
鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列
。科研人员还在两种引物的一端分别加上了 GAATTC
GAATTC
和 GGATCC
GGATCC
序列，以便于后续的剪切和连接。（2）步骤②所构建的基因表达载体中末标注出的必需元件还有
复制原点
复制原点
，步骤③中需先用 Ca2+
Ca2+
处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过逆转录获得DNA，再通过PCR扩增制备探针，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是
鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞（或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录）
鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞（或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录）
。（4）用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验，接种后第19天对照组植株进入病情指数（植物受病毒侵染的严重程度）为100的平台期，而转基因植株在第
22
22
天才进入平台期，但此时的病情指数为79，说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能的原因有 实验得到的干扰素表达量较低，未能很好启动机体产生抗性
实验得到的干扰素表达量较低，未能很好启动机体产生抗性
。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列；GAATTC；GGATCC；复制原点；Ca2+；鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞（或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录）；22；实验得到的干扰素表达量较低，未能很好启动机体产生抗性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：6引用：3难度：0.6
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
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（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
