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长期高血糖可引发血管细胞衰老。科研人员为研究S蛋白在因高血糖引发的血管细胞衰老中的作用,以腺病毒为载体将编码S蛋白的S基因导入血管细胞,实现S蛋白在血管细胞中的大量表达。

(1)腺病毒的遗传物质为DNA,其复制需要E1、E2、E3基因共同完成。为将S基因导入腺病毒,科研人员首先构建了含S基因的重组质粒,如图1所示。在构建含S基因的重组质粒时,通过
设计S基因特异的引物进行PCR
设计S基因特异的引物进行PCR
的方法可鉴定重组质粒是否插入了S基因。将图1中含S基因的重组质粒用
PacⅠ
PacⅠ
酶切割后,获得改造后的腺病毒DNA;将其导入A细胞(A细胞含有E3基因,可表达E3蛋白),如图2所示。腺病毒DNA在A细胞内能够
复制并指导腺病毒外壳蛋白的合成
复制并指导腺病毒外壳蛋白的合成
,从而产生大量重组腺病毒,腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上。
(2)综合上述信息,从生物安全性角度分析重组腺病毒载体的优点:
重组腺病毒只能在A细胞中复制,即使侵染其他细胞,也不能复制;重组腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上;腺病毒是人工改造的载体,不含致病基
重组腺病毒只能在A细胞中复制,即使侵染其他细胞,也不能复制;重组腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上;腺病毒是人工改造的载体,不含致病基
(写出2点)。
(3)用含S基因的重组腺病毒分别感染正常人及糖尿病患者的血管细胞,使S蛋白在血管细胞中大量表达。对正常人、糖尿病患者及二者转入S基因后血管细胞中能促进细胞衰老的I蛋白进行检测,结果如图3所示(颜色越深代表表达量越高)。可用
抗原-抗体杂交
抗原-抗体杂交
方法检测I蛋白的表达量:实验结果显示
糖尿病患者
糖尿病患者
血管细胞中I蛋白表达量最高,推测S蛋白对高血糖引发的血管细胞衰老的作用及机制是
S蛋白通过降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引发的血管细胞衰老
S蛋白通过降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引发的血管细胞衰老

【答案】设计S基因特异的引物进行PCR;PacⅠ;复制并指导腺病毒外壳蛋白的合成;重组腺病毒只能在A细胞中复制,即使侵染其他细胞,也不能复制;重组腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上;腺病毒是人工改造的载体,不含致病基;抗原-抗体杂交;糖尿病患者;S蛋白通过降低Ⅰ蛋白的含量,抑制高血糖引发的血管细胞衰老
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:33引用:5难度:0.7
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    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
  • 3.下列有关基因工程的叙述,正确的是(  )

    发布:2024/12/31 5:0:5组卷:3引用:2难度:0.7
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