从自然界中的生物体内分离得到的天然酶，在工业生产环境中催化效率往往较低。研究人员利用易错PCR技术对某种天然酶进行改造，获得了高催化效率的酶。易错PCR是利用低保真的Taq酶和改变PCR的反应条件，降低DNA复制的准确性，在新DNA链的合成过程中增加碱基错配，从而使扩增产物出现较多点突变的一种体外诱导DNA序列变异的方法。如图是利用易错PCR改造某种天然酶的流程示意图。回答下列问题：
（1）Taq酶的某一区域负责将碱基与模板链正确地互补配对，Mn2+可以降低这一功能；非互补的碱基对由于氢键不易形成，稳定性差，Mg2+可以提高该错配区的稳定性。因此，与普通PCR相比，易错PCR的反应体系中应适当 提高提高（填“提高”或“降低”）Mn2+浓度、提高提高（填“提高”或“降低”）Mg2+浓度。
（2）图中步骤①为易错PCR过程，其扩增过程包括 变性、复性、延伸变性、复性、延伸三步。在扩增过程中，不需要在每次循环中重复加入Taq酶，是因为Taq酶具有 耐高温（或在高温下能保持酎的话性）耐高温（或在高温下能保持酎的话性）的特点。
（3）图中步骤②是将构建的重组质粒溶于缓冲液中与用 Ca2+Ca2+处理的受体菌混合，在一定温度下完成转化。转化是指 目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
（4）请阐述通过易错PCR技术改造天然酶与通过蛋白质工程改造天然酶的本质区别。 易错PCR技术是利用基因突变的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白质工程是利用基因重组的原理来改造天然酶，是定向的易错PCR技术是利用基因突变的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白质工程是利用基因重组的原理来改造天然酶，是定向的。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】提高；提高；变性、复性、延伸；耐高温（或在高温下能保持酎的话性）；Ca2+；目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程；易错PCR技术是利用基因突变的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白质工程是利用基因重组的原理来改造天然酶，是定向的
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：16引用：2难度：0.7
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
2．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
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