幽门螺杆菌（Hp）是消化性溃疡、慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，Hp可产生极为丰富的高活性的脲醇，免疫接种对Hp感染具有预防作用。研究者利用基因工程制备Hp疫苗的部分流程如图所示，图中①一④代表实验步骤；bp代表碱基对；Ampr代表氨苄西林抗性基因，▼代表限制酶的酶切位点；酶1与酶2识别不同的核苷酸序列。回答下列问题；
（1）采用PCR技术扩增lpp20基因时，需要加入DNA聚合酶，其作用是 催化合成DNA子链催化合成DNA子链。通过控制 温度温度使DNA复制在体外反复进行。在实际操作时，加入四种脱氧核苷三磷酸作为DNA复制的原料，每接入一个核苷酸，伴随若两个特殊化学键断裂。
（2）质粒pZY的作用是 将目的基因（lpp20基因）导入大肠杆菌将目的基因（lpp20基因）导入大肠杆菌。在步骤③中一般先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，原因是 经Ca2+处理的大肠杆菌吸收周围环境中DNA分子的能力增强经Ca2+处理的大肠杆菌吸收周围环境中DNA分子的能力增强。
（3）步骤②中，已知在氨苄西林抗性基因内有一段碱基序列
，则图中酶1和酶2的最佳组合是 HindⅢ和XbaⅠHindⅢ和XbaⅠ（注；SpeⅠ：A↓CTAGT；HindⅢ：A↓AGCTT；XbaⅠ：T↓CTAGA）。步骤④中使用含氨苄青霉素的培养基培养，目的是 将含目的基因（lpp20基因）的大肠杆菌细胞筛选出来将含目的基因（lpp20基因）的大肠杆菌细胞筛选出来。
（4）临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是； Hp产生的脲酶能将14C标记的尿素分解为氨和12CO2Hp产生的脲酶能将14C标记的尿素分解为氨和12CO2。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】催化合成DNA子链；温度；将目的基因（lpp20基因）导入大肠杆菌；经Ca2+处理的大肠杆菌吸收周围环境中DNA分子的能力增强；HindⅢ和XbaⅠ；将含目的基因（lpp20基因）的大肠杆菌细胞筛选出来；Hp产生的脲酶能将14C标记的尿素分解为氨和12CO2
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：6引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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