血凝素基因（HA）编码的血凝素是构成流感病毒囊膜纤突的主要成分。成熟的血凝素包含HA1和HA2两个亚单位，其中HA1含有病毒与受体相互作用的位点。IgGFc基因片段（长度为717bp）编码人IgG抗体中的一段小肽，常作为融合蛋白标签。蛋白质分泌依赖于信号肽的引导，本研究中用信号肽IL-2SS代替HA自身信号肽，科研人员尝试构建IL-2SS/HA1/IgGFc融合蛋白表达载体，并导入大肠杆菌表达和分泌，请回答：
（1）流感病毒囊膜主要由 蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂组成，囊膜上血凝素的合成场所在 宿主细胞的核糖体宿主细胞的核糖体。
（2）本实验用信号肽IL-2SS代替HA自身信号肽有利于 融合蛋白表达并避免自身产生的融合蛋白与自身受体结合融合蛋白表达并避免自身产生的融合蛋白与自身受体结合，PCR扩增目的基因时应该选择图中引物 bb。
（3）设计引物时，不能包含基因HA1的终止密码子的编码序列，原因是 若设计引物是含有HA1的终止密码子，则核糖体读到终止密码子时就停止翻译，导致IgGFc基因不能正常表达若设计引物是含有HA1的终止密码子，则核糖体读到终止密码子时就停止翻译，导致IgGFc基因不能正常表达。引物序列的长度及 CG含量CG含量直接影响着PCR过程中退火温度的设定。
（4）应选择限制酶 EcoRVEcoRV来切割质粒A，然后直接将PCR产物与质粒A混合，同时加入 DNA连接DNA连接酶，使得目的基因与质粒A相连。若目的基因与质粒A正向连接，用BamHⅠ和SacⅠ同时切割重组质粒，完全酶切后的产物的长度约为 717717bp。
（5）融合蛋白中的标签蛋白有利于目的蛋白的分离和纯化，基因工程生产HA1作为疫苗时，选择人IgGFc作为标签的优点还有 人体自身即可产生IgG抗体，避免了制作单克隆抗体的复杂过程人体自身即可产生IgG抗体，避免了制作单克隆抗体的复杂过程。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】蛋白质和磷脂；宿主细胞的核糖体；融合蛋白表达并避免自身产生的融合蛋白与自身受体结合；b；若设计引物是含有HA1的终止密码子，则核糖体读到终止密码子时就停止翻译，导致IgGFc基因不能正常表达；CG含量；EcoRV；DNA连接；717；人体自身即可产生IgG抗体，避免了制作单克隆抗体的复杂过程
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：56引用：6难度：0.9
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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