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请回答下列(一)、(二)小题:
(一)随环保要求的提高,沼气、天然气等作为清洁能源气体备受人们青睐。而这些气体生成时常含有不同浓度的H2S易腐蚀输送管道设备等。生物法去除H2S效率高、成本低,但有副产物生成,且副产物积累常会导致体系中钠盐浓度升高,从而显著抑制S2-去除速率,因此有必要筛选噬盐性强、脱硫性能优越、需氧型的菌种。筛选中用到的培养基有液体富集培养基、高盐筛选培养基、基础培养基。筛选土样有:晒盐场污泥、富含S的普通土壤、富含腐殖质的土壤。
(1)为快速分离噬盐性强的菌种,可将
晒盐场污泥
晒盐场污泥
土样用
无菌水(或蒸馏水)
无菌水(或蒸馏水)
制成悬液,再将含有沉淀物的悬液置于36℃的
液体富集
液体富集
培养基中培养2d,其目的是
增加噬盐性强的微生物的数量
增加噬盐性强的微生物的数量

(2)为确定筛选菌种的耐盐能力,将上述悬液稀释后涂布于
高盐筛选
高盐筛选
培养基上培养,对照组的设置为
等量悬液稀释后涂布于基础培养基上
等量悬液稀释后涂布于基础培养基上

(二)新冠病毒的刺突蛋白(S蛋白)是一种糖基化修饰的蛋白质,能与人体细胞的ACE2受体识别和结合,用S蛋白制成的疫苗对人体更安全,中国科学院等利用基因工程的方法在工程细胞中获取抗原蛋白,制作重组蛋白疫苗。
(3)在重组蛋白疫苗制作过程中,将S蛋白的基因导入酵母菌等真核细胞的原因是
酵母菌等细胞是真核细胞,有内质网和高尔基体,可对核糖体合成的蛋白质进行加工、修饰,以获得具有生物活性的S蛋白
酵母菌等细胞是真核细胞,有内质网和高尔基体,可对核糖体合成的蛋白质进行加工、修饰,以获得具有生物活性的S蛋白
。我国的新冠病毒重组蛋白疫苗,是将相应的基因表达载体导入CHO(仓鼠卵巢细胞)中获得的,动物细胞培养需要满足的基本条件有:
营养,无菌、无毒的环境,适宜的温度、pH和渗透压,适宜的气体环境等
营养,无菌、无毒的环境,适宜的温度、pH和渗透压,适宜的气体环境等
(至少答出3个)。
(4)构建基因表达载体时,常用两种限制酶对载体和目的基因进行切割,而不是用单酶切割的原因是
使用两种限制酶可防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,也可防止目的基因和质粒的反向连接
使用两种限制酶可防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,也可防止目的基因和质粒的反向连接

(5)最后破碎细胞后,可用
抗原—抗体杂交
抗原—抗体杂交
法检测S蛋白是否表达。

【答案】晒盐场污泥;无菌水(或蒸馏水);液体富集;增加噬盐性强的微生物的数量;高盐筛选;等量悬液稀释后涂布于基础培养基上;酵母菌等细胞是真核细胞,有内质网和高尔基体,可对核糖体合成的蛋白质进行加工、修饰,以获得具有生物活性的S蛋白;营养,无菌、无毒的环境,适宜的温度、pH和渗透压,适宜的气体环境等;使用两种限制酶可防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,也可防止目的基因和质粒的反向连接;抗原—抗体杂交
【解答】
【点评】
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