拟南芥中的生长素运输蛋白（PIN1）对生长素的极性运输具有重要作用。为研究35S启动子（一种来自病毒的强启动子）能否引起下游基因的过量表达，研究人员将35S启动子与PINI基因转入拟南芥，观察PIN1过量表达对拟南芥的影响。回答下列问题：
（1）研究人员获取含PINl基因的mRNA后，通过逆转录获得DNA，再以DNA为模板进行PCR扩增获取PINI基因，该过程需要的原料是 4种脱氧核苷酸4种脱氧核苷酸。PCR循环时，首先需要将温度上升到90℃，目的是 使双链DNA 解聚为单链使双链DNA 解聚为单链。
（2）PCR扩增PIN1基因时，需要两种引物，据图1分析，应选择引物 1、21、2。图1、2中的PstⅠ、EcoRⅠ、XhoⅠ表示限制酶，为使获取的 PINl 基因与质粒正确连接，根据图1、2分析，应当选择的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠPstⅠ、EcoRⅠ。
（3）获取PINI基因后，需要将35S启动子与 PINI基因一起构建为基因表达载体，35S启动子的作用是 作为RNA聚合酶识别和结合位点，驱动 PINI 基因转录出mRNA作为RNA聚合酶识别和结合位点，驱动 PINI 基因转录出mRNA。
（4）为检测目的基因是否导入拟南芥，在分子水平上，实验人员先从转基因拟南芥的DNA中扩增出35S启动子和PINl基因，然后采用电泳来鉴定35S启动子，但不鉴定 PINl基因，其理由是 拟南芥细胞中原本存在 PINI 基因，检测 PINI 基因无法确定外源 PIN1 基因是否导入受体细胞拟南芥细胞中原本存在 PINI 基因，检测 PINI 基因无法确定外源 PIN1 基因是否导入受体细胞。在个体水平上，还可以采取的检测方法是 对转基因拟南芥喷洒适宜浓度的除草剂，观察其能否存活对转基因拟南芥喷洒适宜浓度的除草剂，观察其能否存活。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】4种脱氧核苷酸；使双链DNA 解聚为单链；1、2；PstⅠ、EcoRⅠ；作为RNA聚合酶识别和结合位点，驱动 PINI 基因转录出mRNA；拟南芥细胞中原本存在 PINI 基因，检测 PINI 基因无法确定外源 PIN1 基因是否导入受体细胞；对转基因拟南芥喷洒适宜浓度的除草剂，观察其能否存活
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/4 8:0:9组卷：10引用：3难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
