利用酵母菌分解废纸是一种环保的方式，但废纸中的纤维素分子量大不能直接进入酵母菌，且酵母菌无法分解利用环境中的纤维素。为解决这一难题，科学家将纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌。其所用质粒及其酶切位点如下图1，外源DNA 上的纤维素酶基因及其酶切位点如图2。请回答下列问题：
（1）图1、图2中的质粒和纤维素酶基因分别作为重组DNA技术中的 运载体和目的基因运载体和目的基因，为防止目的基因自身环化，图中可选用的最合适的限制酶是 HindⅢ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ。
（2）若质粒被 HindⅢ限制酶识别的序列是-AAGCTT-，并在 A 与A 之间切割。请画出被切割后所形成的黏性末端。
（3）科学家进一步构建了含3种不同基因片段的重组质粒，进行了一系列的研究。图3是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。
①图3中已导入重组质粒的菌株有 菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
②将4株菌株分别置于以 纤维素纤维素为唯一碳源的培养基上，其中菌株I、II不能存活，请解释菌株II不能存活的原因。 菌株Ⅱ虽能合成纤维素分解酶，但是不能将酶释放到细胞外起作用，而纤维素也不能进入细胞菌株Ⅱ虽能合成纤维素分解酶，但是不能将酶释放到细胞外起作用，而纤维素也不能进入细胞。
③在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具有优势，原因是 使纤维素酶可以固定于细胞壁表面使纤维素酶可以固定于细胞壁表面。
【答案】运载体和目的基因；HindⅢ和PstⅠ；菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ；纤维素；菌株Ⅱ虽能合成纤维素分解酶，但是不能将酶释放到细胞外起作用，而纤维素也不能进入细胞；使纤维素酶可以固定于细胞壁表面
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：3引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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