水稻纹枯病是由立枯丝核菌引起的，是水稻的三大病害之一。科学研究发现伯克霍尔德氏菌 JP2-270 菌株所产生的硝吡咯菌素可以有效抑制水稻纹枯病。通过靶向基因敲除明确了菌株 JP2-270硝吡咯菌素合成酶基因的作用并对其完成测序，培育转基因水稻，防治水稻纹枯病。请分析回答。
（1）伯克霍尔德氏菌JP2-270菌株的培养：取样后采用 平板划线法或稀释涂布平板法平板划线法或稀释涂布平板法实现分离和纯化，再对其进行 液体悬浮培养液体悬浮培养培养，使其扩增。
（2）转基因水稻的培育：根据JP2-270基因组中目的基因的 两端序列或上下游序列两端序列或上下游序列设计引物，通过PCR扩增目的基因。需将纯化后的目的基因片段插入到Ti质粒的T-DNA内部，原因是 T-DNA可以插入到受体细胞的染色体DNA上T-DNA可以插入到受体细胞的染色体DNA上。构建好的重组质粒导入水稻愈伤组织中，根据 核酸分子杂交核酸分子杂交技术检测目的基因是否成功导入。筛选成功后，将愈伤组织先后在生芽培养基、生根培养基上培养，最终发育成完整植株，该过程属于 器官发生器官发生途径。
（3）转基因水稻对水稻纹枯病防治效果如下表，对此分析可以得出的结论有 转基因水稻防治效果与对照组相比有极显著差异，抑菌率较高，转基因水稻的防治效果与井冈霉素处理无显著差异转基因水稻防治效果与对照组相比有极显著差异，抑菌率较高，转基因水稻的防治效果与井冈霉素处理无显著差异。
| 组别 | 平均病斑长度（cm） |
| 普通水稻叶片 | 7.00±1.25 |
| 转基因水稻叶片 | 0.75±0.20 |
| 井冈霉素（杀菌剂）处理的普通水稻叶片 | 0.69±0.50 |
促进
促进
（促进或抑制）硝吡咯菌素合成酶基因簇的表达，从而调控硝吡咯菌素的合成。
【答案】平板划线法或稀释涂布平板法；液体悬浮培养；两端序列或上下游序列；T-DNA可以插入到受体细胞的染色体DNA上；核酸分子杂交；器官发生；转基因水稻防治效果与对照组相比有极显著差异，抑菌率较高，转基因水稻的防治效果与井冈霉素处理无显著差异；促进
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：3引用：1难度：0.6
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
2．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
