抗体的基因工程改造经历了最早期的人鼠嵌合单抗、人源化单抗,以及近年来的完全人源化单抗3个发展阶段。

鼠源单抗人-鼠嵌合单抗人源化单抗完全人源化单抗
请回答:
(1)人-鼠嵌合单抗是通过从杂交瘤杂交瘤细胞中提取总RNA,在逆转录逆转录酶的作用下形成互补DNA,然后以此DNA为模板扩增得到功能性可变区基因,再与人抗体支架区基因通过DNA连接酶DNA连接酶连接,插入适当表达载体,转染宿主细胞表达产生。
(2)人源化单抗技术主要是通过基因工程的方法将鼠源抗体的识别抗原分子的特殊部分识别抗原分子的特殊部分,即互补决定区组装到人源抗体的支架区。该技术的缺点之一,在进行人源化改造之前,必须先制备出鼠源性抗某一特定抗原的单克隆抗体单克隆抗体。
(3)完全人源化单抗包括噬菌体展示库技术和转基因鼠技术。噬菌体展示抗体库技术:将人类抗体基因文库基因文库序列用PCRPCR技术扩增出来后插入到噬菌体蛋白的编码基因中,使抗体与噬菌体外壳蛋白形成融合蛋白而被展示到噬菌体表面(可展示针对几乎所有抗原的人源性抗体)。完全人抗体的制备则是来源于转基因小鼠:主要操作是通过基因敲除基因敲除技术将小鼠自身的抗体编码基因替换为人类抗体编码基因,而小鼠免疫系统中的其他功能组件并不受影响。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】杂交瘤;逆转录;DNA连接酶;识别抗原分子的特殊部分;单克隆抗体;基因文库;PCR;基因敲除
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:4引用:2难度:0.7
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