人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用．口服α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效．如图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示．请回答下列问题：
| 限制酶 | 识别序列和切割位点 |
| EcoRⅠ |  |
| BamHⅠ |  |
干扰素基因两端的部分核苷酸序列
干扰素基因两端的部分核苷酸序列
．科研人员还在两种引物的一端分别加上了GAATTC
GAATTC
和GGATCC
GGATCC
序列，以便于后续的剪切和连接．（2）过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需结构还有
复制原点
复制原点
，过程③中需先用Ca2+
Ca2+
处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞．（3）过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过
逆转录
逆转录
过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录
干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录
．（4）治疗中发现，用于口服的α-干扰素在胃中会受到一定程度的破坏影响其功效，需要利用
蛋白质工程
蛋白质工程
技术加以改造，以达到满意效果．【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】干扰素基因两端的部分核苷酸序列；GAATTC；GGATCC；复制原点；Ca2+；逆转录；干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录；蛋白质工程
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：8引用：1难度：0.3
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
