2020年的诺贝尔生理学或医学奖授予Harvey J．Alter博士、Michael Houghton博士和 Charles M．Rice博士，以表彰他们对丙肝病毒的重要发现。丙肝病毒（HCV）是一种RNA病毒，人们将得到的HCV的多个抗原基因首尾相连，连接在同一调控组件下，可构成HCV融合基因。经基因工程产生出的HCV融合抗原可用于制作第三代HCV抗体检测试剂。回答下列问题：
（1）获得融合基因，即以相关的RNA为模板合成cDNA然后拼接起来，这个过程需要的酶有 逆转录酶、DNA连接酶逆转录酶、DNA连接酶。其次要利用PCR技术扩增融合基因，即先根据融合基因的核苷酸序列，设计并合成引物，若该融合基因的序列为
（虚线处省略了部分核苷酸序列），则PCR设计应选用的两种引物的部分序列应分别为：①5'—AACTAT—3'，②5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）。引物能与变性的融合基因单链结合，在 Taq酶Taq酶催化作用下延伸，如此循环多次。
（2）构建表达载体，如图所示，表达载体上除了标注的DNA片段外，在融合基因上游还必须拥有 启动子启动子，其作用是 是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动融合基因转录出mRNA是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动融合基因转录出mRNA
（3）用含 硫酸卡那霉素硫酸卡那霉素的培养基筛选出能生长的菌落。
（4）抗原蛋白是 HCV融合基因表达HCV融合基因表达的产物，将抗原蛋白注射到动物体内，通过 体液体液免疫过程产生抗体，可制作出第三代HCV抗体检测试剂。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】逆转录酶、DNA连接酶；5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）；Taq酶；启动子；是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动融合基因转录出mRNA；硫酸卡那霉素；HCV融合基因表达；体液
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：7引用：2难度：0.6
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
2．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：4引用：3难度：0.7
