MAP30蛋白是一种能使Ⅰ型核酸核糖体失活的蛋白质，存在于苦瓜果实和种子中。实验表明，MAP30蛋白具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒等功能，近年来引起人们的广泛关注。现有一科研团队欲培育高效表达该蛋白基因的马铃薯新品种。请回答下列问题：
（1）若要获取MAP30蛋白基因，人们可从苦瓜苦瓜基因库中获得。获得目的基因后可利用PCR技术对其进行扩增，所用的缓冲液中除目的基因外，应包括4种脱氧（核糖）核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）4种脱氧（核糖）核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）等物质。
（2）构建基因表达载体时，需要使用到的酶是限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶。为了避免出现“目的基因自我环化”、“目的基因在运载体上反向连接”的问题，常用的解决办法是：分别使用两种限制酶去剪切目的基因和运载体分别使用两种限制酶去剪切目的基因和运载体。
（3）将基因表达载体导入马铃薯受体细胞后，可用植物组织培养植物组织培养技术得到转基因幼苗。检测MAP30蛋白基因是否在受体细胞中成功表达，可用抗原-抗体杂交技术抗原-抗体杂交技术。
（4）科研人员为了研究MAP30蛋白抗弧菌的效果，用含不同浓度MAP30蛋白培养液培养弧菌，绘制弧菌生长曲线如图：
由图可以得出的结论是随着MAP30蛋白浓度的升高，MAP30蛋白对弧菌生长的抑制作用增强；当MAP30蛋白浓度达到或高于500g/mL时，弧菌生长完全被抑制随着MAP30蛋白浓度的升高，MAP30蛋白对弧菌生长的抑制作用增强；当MAP30蛋白浓度达到或高于500g/mL时，弧菌生长完全被抑制。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】苦瓜；4种脱氧（核糖）核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；限制酶和DNA连接酶；分别使用两种限制酶去剪切目的基因和运载体；植物组织培养；抗原-抗体杂交技术；随着MAP30蛋白浓度的升高，MAP30蛋白对弧菌生长的抑制作用增强；当MAP30蛋白浓度达到或高于500g/mL时，弧菌生长完全被抑制
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：0引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
