研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒，下图为转基因啤酒酵母的生产过程。回答下列问题：
（1）已知DNA复制时子链的延伸方向是5′→3′，图1中A、B、C、D在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增LTP1基因，必须要有 有一段已知目的基因的核苷酸序列有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。扩增LTP1基因时应该选用图1中的 B和CB和C作为引物。
（2）基因表达载体的构建基因表达载体的构建是实施基因工程的核心。图2中的B为质粒，质粒和LTP1基因结合形成重组质粒C。重组质粒C在受体细胞中能够稳定存在并发挥作用，在LTP1基因的首端必须具有 启动子启动子，尾端必须具有终止子，还必须含有标记基因和目的基因。
（3）为检测目的基因在受体细胞基因组中的整合情况，首先采用分子杂交技术检测LTP1基因是否导入成功，需要从转基因啤酒酵母中提取DNA，用 放射性同位素标记的目的基因（LTPI基因）单链放射性同位素标记的目的基因（LTPI基因）单链作探针与之杂交。还可分别用含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有图2中C导入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是 在含有青霉素的培养基上存活，但不能在含有四环素的培养基上存活在含有青霉素的培养基上存活，但不能在含有四环素的培养基上存活。
（4）为检测转基因啤酒酵母是否产生LTP1蛋白，除检测LTP1蛋白是否产生及含量外，还可观察转基因啤酒酵母所酿啤酒的 泡沫丰富程度泡沫丰富程度进行判断，若能检测到LTP1蛋白，但效果差，可能的原因是 LTPI基因表达效率低，合成的LTPI蛋白少LTPI基因表达效率低，合成的LTPI蛋白少；若经检测确定细胞中无LTP1蛋白，可采用PCR技术检测细胞中的RNA，如果能检测到mRNA，则可能是 （LTPI基因）未能正常翻译（LTPI基因）未能正常翻译；如果检测后确定细胞中无LTP1蛋白的mRNA，但之前能检测到LTP1基因，则LTP1基因未能正常转录的原因可能是 LTPI基因反向插入质粒DNA分子中LTPI基因反向插入质粒DNA分子中。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】有一段已知目的基因的核苷酸序列；B和C；基因表达载体的构建；启动子；放射性同位素标记的目的基因（LTPI基因）单链；在含有青霉素的培养基上存活，但不能在含有四环素的培养基上存活；泡沫丰富程度；LTPI基因表达效率低，合成的LTPI蛋白少；（LTPI基因）未能正常翻译；LTPI基因反向插入质粒DNA分子中
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：14引用：2难度：0.5
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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