径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草的TaNHX2基因转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段，图中箭头所指为Sau3AI、EcoRI、BamHI三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图，请分析回答问题：
（1）基因工程的核心步骤是 基因表达载体的构建基因表达载体的构建。
（2）将含有径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据TaNHX2基因的特定核苷酸序列从中提取图1的片段，此法为从 基因文库基因文库获取目的基因。此外也可利用PCR技术扩增TaNHX2基因，需要加入的酶是 Taq酶Taq酶，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，55～60℃有利于 引物引物结合到互补DNA链上。
（3）若用BamHⅠ切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用限制酶 Sau3AⅠSau3AⅠ切割图3所示质粒，该方案的缺陷是 目的基因或质粒自身环化（或目的基因在质粒上的连接方向不确定）目的基因或质粒自身环化（或目的基因在质粒上的连接方向不确定）（答出一点即可）。
（4）目的基因是否成功转录出了mRNA，常用 分子杂交分子杂交的方法进行检测，为了检测技术成果，科研工作者将转基因棉花种植在盐碱地，观察其生长状况，这属于 个体个体水平的检测。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】基因表达载体的构建；基因文库；Taq酶；引物；Sau3AⅠ；目的基因或质粒自身环化（或目的基因在质粒上的连接方向不确定）；分子杂交；个体
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/8/9 8:0:9组卷：1引用：1难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
