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动物血液常常被选作提取血红蛋白的实验材料,请回答下列有关问题:
(1)实验前取新鲜的血液,要在采血容器中预先加入
柠檬酸钠
柠檬酸钠
,其作用是
防止血液凝固
防止血液凝固
。样品处理及粗分离应包括
红细胞的洗涤
红细胞的洗涤
、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析。
(2)下列试剂或仪器可用于血红蛋白释放的是
BDF
BDF

A.0.9%的生理盐水
B.甲苯
C.磷酸缓冲液
D.蒸馏水
E.离心机
F.磁力搅拌器
(3)凝胶色谱法分离血红蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG-75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及
分离范围
分离范围
,75的含义是
每克凝胶膨胀时吸水7.5克
每克凝胶膨胀时吸水7.5克
。为加快凝胶膨胀,可以将湿凝胶用沸水浴加热,这样不仅节约时间,还能
去除凝胶中带有的微生物,排除凝胶内的空气
去除凝胶中带有的微生物,排除凝胶内的空气
。填装凝胶柱时不得有气泡,原因是
气泡会扰乱洗脱液中蛋白质洗脱次序,降低分离效果
气泡会扰乱洗脱液中蛋白质洗脱次序,降低分离效果

(4)电泳是分离鉴定蛋白质的常用方法。一个蛋白质分子在某pH溶液时,蛋白质解离成正负离子,当蛋白质净电荷为0时对应的溶液pH称为该蛋白质的等电点(pI)。蛋白质所处溶液pH>pI时,蛋白质带负电荷,反之带正电荷。下表为几种血清蛋白的等电点,将血清蛋白在pH=8.6的缓冲液中进行电泳,结果如图所示。
蛋白质种类 清蛋白 α1球蛋白 α2球蛋白 β球蛋白 γ球蛋白
等电点(pI) 4.84 5.06 5.06 5.12 6.8~7.3
据图分析,带负电荷最多的球蛋白是
清蛋白
清蛋白
,α1和α2球蛋白分子量较小的是
α1球蛋白
α1球蛋白

【答案】柠檬酸钠;防止血液凝固;红细胞的洗涤;BDF;分离范围;每克凝胶膨胀时吸水7.5克;去除凝胶中带有的微生物,排除凝胶内的空气;气泡会扰乱洗脱液中蛋白质洗脱次序,降低分离效果;清蛋白;α1球蛋白
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:13引用:3难度:0.4
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