抗菌肽具有热稳定性以及广谱抗细菌等特点，其广泛的生物学活性显示了其在医学上良好的应用前景。科研工作者将若干编码抗菌肽（ABP）序列按照首尾相连的方式插在质粒PLG339的布康唑抗性基因内部，形成长度为4800bp（1bp为一个碱基对）的重组质粒PLG339-nABP，相关过程如图所示。已知重组质粒中，每个编码ABP序列中都含有限制酶AccⅢ的一个切点，基因trpA的表达产物可使细胞利用无机氮源合成色氨酸（色氨酸是微生物生长必须的氨基酸）。请据图1回答下列问题：
（1）若PLG339-nABP经限制酶AccⅢ处理后，产生66 bp和4 140 bp两种长度的DNA片段，则这些DNA片段共有1111个，单个抗菌肽（ABP）最多由2222个氨基酸构成（不考虑终止密码）。
（2）现有大肠杆菌和酵母菌两种菌群，可作为导入PLG339-nABP的受体细胞的是酵母菌酵母菌，理由是抗菌肽具有杀灭细菌的作用（不能杀灭酵母菌）抗菌肽具有杀灭细菌的作用（不能杀灭酵母菌）。
（3）若选定的受体细胞为trpA基因缺陷型，则需采用两步法筛选含重组质粒的细胞。第一步筛选的固体培养基在营养成分上的要求是含无机氮源而不含色氨酸含无机氮源而不含色氨酸，第二步采用“影印法”，将第一步所得菌落转移到新的培养基上进行培养，该培养基中应添加布康唑布康唑。通过对照，最终选出能在第一步培养基上生长，而不能在第二步培养基上生长的菌落即为符合要求的成功导入重组质粒的细胞。
（4）在测试转基因表达产物ABP对金黄色葡萄球菌的杀菌效果时获得了如图2所示的结果，据此可获得的结论是ABP抑菌效果与ABP的浓度浓度和金黄色葡萄球菌的不同培养时期/天数不同培养时期/天数有关。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】11；22；酵母菌；抗菌肽具有杀灭细菌的作用（不能杀灭酵母菌）；含无机氮源而不含色氨酸；布康唑；浓度；不同培养时期/天数
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：16引用：1难度：0.6
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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