血友病B是凝血IX因子（hFIX）缺乏所导致的一种出血性疾病，通过输血和凝血IX因子浓缩剂进行治疗疗效显著，但存在治疗费用高和安全隐患。我国科研人员利用转基因技术，使凝血IX因子基因在烟草叶片中表达，为凝血IX因子大规模生成提供了新的思路。回答下列问题：
（1）科研人员选择烟草细胞作为受体细胞，而未选择大肠杆菌的原因是 烟草叶细胞是真核细胞，能够对hFIX合成、加工和修饰，而大肠杆菌是原核细胞，产生的hFIX无法加工或错误加工烟草叶细胞是真核细胞，能够对hFIX合成、加工和修饰，而大肠杆菌是原核细胞，产生的hFIX无法加工或错误加工（答出一点即可）。
（2）根据已知的hFIX氨基酸序列，采用 化学方法或人工合成化学方法或人工合成方法得到hFIX基因，并采用PCR技术扩增hFIX基因。采用该方法得到的hFIX基因碱基排列顺序可以有多种，理由是 有的氨基酸有多种密码子与之相对应，因此由同一氨基酸序列可以得到多种RNA碱基排列顺序，进而可推测出多种基因碱基序列有的氨基酸有多种密码子与之相对应，因此由同一氨基酸序列可以得到多种RNA碱基排列顺序，进而可推测出多种基因碱基序列。
（3）转化烟草的基因表达载体的组成除了启动子、hFIX基因和终止子之外，还需具有的结构是 标记基因标记基因，其作用是 鉴别受体细胞中是否含有hFIX基因，从而将含有hFIX基因的细胞筛选出来（或重组DNA的筛选与鉴定）鉴别受体细胞中是否含有hFIX基因，从而将含有hFIX基因的细胞筛选出来（或重组DNA的筛选与鉴定）。
（4）通过 农杆菌转化农杆菌转化法将（3）获得的基因表达载体导入烟草叶片，经 植物组织培养植物组织培养过程最终获得四株转hFIX基因的烟草。
（5）写出检测hFIX基因是否翻译成hFIX的主要实验步骤：将转基因烟草制成匀浆后提取蛋白质，用抗hFIX的抗体进行抗原—抗体杂交，观察是否出现杂交带将转基因烟草制成匀浆后提取蛋白质，用抗hFIX的抗体进行抗原—抗体杂交，观察是否出现杂交带。研究发现，hFIX基因在这四株转基因烟草中的表达存在较大的差异，原因可能是 hFIX基因在转基因烟草基因组中的拷贝数不同；hFIX基因在转基因烟草基因组中的整合位置不同hFIX基因在转基因烟草基因组中的拷贝数不同；hFIX基因在转基因烟草基因组中的整合位置不同。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】烟草叶细胞是真核细胞，能够对hFIX合成、加工和修饰，而大肠杆菌是原核细胞，产生的hFIX无法加工或错误加工；化学方法或人工合成；有的氨基酸有多种密码子与之相对应，因此由同一氨基酸序列可以得到多种RNA碱基排列顺序，进而可推测出多种基因碱基序列；标记基因；鉴别受体细胞中是否含有hFIX基因，从而将含有hFIX基因的细胞筛选出来（或重组DNA的筛选与鉴定）；农杆菌转化；植物组织培养；将转基因烟草制成匀浆后提取蛋白质，用抗hFIX的抗体进行抗原—抗体杂交，观察是否出现杂交带；hFIX基因在转基因烟草基因组中的拷贝数不同；hFIX基因在转基因烟草基因组中的整合位置不同
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：10引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
