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CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术,科研人员对其进行了一系列改造。

(1)Cas9蛋白能与人工设计的sgRNA形成复合体(如图1)。复合体中的sgRNA与目的基因按照
碱基互补配对
碱基互补配对
原则特异性结合。复合体在sgRNA引导下结合目的基因,Cas9蛋白切割目的基因造成双链断裂,细胞在修复断裂的DNA时会随机插入、删除或替换部分碱基对,从而引发
基因突变
基因突变

(2)将编码Cas9蛋白的基因改造后形成新基因dCas9,与Cas9蛋白相比,dCas9蛋白失去剪切活性,但与sgRNA结合等功能不变。构建能够表达dCas9的质粒A,设计一系列与红色荧光蛋白基因(RFP基因)上游不同部位结合的sgRNA序列(如图2),并以此为依据构建能表达sgRNA的质粒B,将质粒A、B共同导入含有 RFP基因的大肠杆菌,测定大肠杆菌红色荧光强度,实验结果如图3所示。实验结果显示,对照组的红色荧光强度约为sgRNA3组的
100
100
倍。由实验结果可以得出:
dCas9能抑制基因表达,sgRNA的结合位置距RNA聚合酶结合位点越近,对基因表达的抑制作用越强
dCas9能抑制基因表达,sgRNA的结合位置距RNA聚合酶结合位点越近,对基因表达的抑制作用越强

(3)VP64蛋白可结合RNA聚合酶,激活基因的转录,但VP64蛋白无法识别或结合特定的DNA片段。科研人员欲利用上述系统和VP64蛋白促进特定基因表达,请设计促进细胞中已存在的基因X表达的方案。
(4)请写出CRISPR/Cas9及其改造产品的在科学研究中的应用。

【答案】碱基互补配对;基因突变;100;dCas9能抑制基因表达,sgRNA的结合位置距RNA聚合酶结合位点越近,对基因表达的抑制作用越强
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:38引用:1难度:0.6
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  • 1.下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是(  )

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.7
  • 2.几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
  • 3.下列有关基因工程的叙述,正确的是(  )

    发布:2024/12/31 5:0:5组卷:3引用:2难度:0.7
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