对土壤中分解纤维素的微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。为了寻求高效降解纤维素的微生物，某科研团队进行了纤维素优势分解菌的筛选实验。主要步骤如下：
①制备培养基。
②纤维素分解菌的分离、纯化。取富集培养后的土样培养液，经适当稀释后，移取培养液各0.1mL分别接种到能分别筛选出细菌、真菌和放线菌的固体培养基上进行分离、纯化培养。
③纤维素分解菌的初筛。将已经纯化的菌株接种到同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，使用刚果红染色法，根据培养基平板上透明圈直径（H）与菌落直径（h）比值的大小，初步筛选出纤维素优势分解菌。
回答下列问题：
（1）实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的污染防止外来杂菌的污染。
（2）微生物的接种方法很多，最常用的是平板划线法和 稀释涂布平板法稀释涂布平板法。步骤甲和步骤乙是平板划线操作中的两个步骤，步骤甲的操作是将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红；步骤乙的操作是将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液，从步骤甲至步骤乙的操作过程中，还需进行的操作步骤是 在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞；将试管口通过火焰在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞；将试管口通过火焰。
（3）微生物吸收的无机盐的作用是 维持细胞和生物体的生命活动；维持细胞的酸碱平衡（调节渗透压；组成化合物）维持细胞和生物体的生命活动；维持细胞的酸碱平衡（调节渗透压；组成化合物）。（答出二点即可）。
（4）步骤②③中，若将稀释后且富含多种类型微生物的土样培养液直接涂布于同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，可能导致错过优势纤维素分解菌的发现，原因是 不同种类型的微生物之间的生长会相互影响（或多种类型微生物直接接种在同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，各种微生物之间产生竞争关系，生长相互影响，不利于优势纤维素分解菌的发现）不同种类型的微生物之间的生长会相互影响（或多种类型微生物直接接种在同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，各种微生物之间产生竞争关系，生长相互影响，不利于优势纤维素分解菌的发现）。
（5）接种在培养基上初筛分离得到的4个菌株的观察结果如表。表中H/h的大小与纤维素酶的 量与活性量与活性有关。据表分析，降解纤维素能力最强的菌株是 33（填表中菌株编号的序号）。
| 菌株编号 | 菌落直径h（cm） | 透明圈直径H（cm） | H/h |
| 1 | 0.3 | 0.9 | 3.00 |
| 2 | 0.3 | 0.6 | 2.00 |
| 3 | 0.3 | 1.3 | 4.33 |
| 4 | 0.6 | 2.0 | 3.33 |
【答案】防止外来杂菌的污染；稀释涂布平板法；在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞；将试管口通过火焰；维持细胞和生物体的生命活动；维持细胞的酸碱平衡（调节渗透压；组成化合物）；不同种类型的微生物之间的生长会相互影响（或多种类型微生物直接接种在同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，各种微生物之间产生竞争关系，生长相互影响，不利于优势纤维素分解菌的发现）；量与活性；3
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：14引用：1难度：0.7
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
2．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
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