为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将陆地棉的酶D基因与拟南芥叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。
（1）从陆地棉基因文库中获取酶D基因，一般用PCR技术扩增，PCR扩增过程中，需加热至90〜95℃，其目的是使双链DNA解聚为单链使双链DNA解聚为单链；加热至70〜75℃时，互补链可在热稳定DNA聚合（或Taq）热稳定DNA聚合（或Taq）酶的作用下延伸。
（2）如图甲，选用限制酶CiaⅠCiaⅠ处理两个基因后再用DNA连接DNA连接酶处理，得到A、DA、D（填图中字母）端相连的融合基因。
（3）将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T一DNA中，构建基因表达载体基因表达载体并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素四环素（填“氨苄青霉素”、“卡那霉素”、“四环素”或“链霉素”等抗生素）的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基振荡培养，得到用于转化的侵染液。
（4）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞，进一步筛选后获得转基因油菜。
（5）在分子水平上，用抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交方法检验融合基因是否表达成功。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】使双链DNA解聚为单链；热稳定DNA聚合（或Taq）；CiaⅠ；DNA连接；A、D；基因表达载体；四环素；将目的基因导入受体细胞；抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：3引用：3难度：0.6
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
