正常细胞不能合成干扰素，但含有干扰素基因。我国科学家采用基因工程技术生 产干扰素a-2b已实现量产。具体做法是将产生干扰素的人白细胞的mRNA分级分离，反转录得到干扰素基因。将含有四环素、氨节青霉素抗性基因的质粒pBR322和干扰素 基因进行双酶切，用连接酶连接。将重组载体DNA分子在一定条件下导入大肠杆菌，在 培养基中筛选培养，检测干扰素的表达量，选出高效表达的工程菌。请回答：
（1）在分化诱导因子作用下，正常细胞可以摆脱抑制、合成干扰素，该过程发生的实质是基因的选择性表达基因的选择性表达。
（2）据图分析，构建重组载体DNA分子时，可以选用酶B、酶C酶B、酶C两种限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切，目的是既能保证目的基因和质粒正向连接，又能防止质粒与目的基因自身环化；防止同时破坏质粒中的两个标记基因质粒与目的基因自身环化；防止同时破坏质粒中的两个标记基因（答两点）。
（3）将重组质粒导入大肠杆菌中，然后将细菌涂布到含氨苄青霉素氨苄青霉素的选择培养基上培 养，就可得到质粒pBR322或重组质粒的细菌单菌落；再从每一个单菌落中挑取部分细 菌转涂到含有四环素四环素的培养基上，不能生长的绝大部分是含有重组质粒的细菌，原因是目的基因的插入破坏了四环素抗性基因，重组质粒上只含有氨苄青霉素抗性基因，而质粒上含氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，在含有四环素的培养基上，导入重组质粒的细菌不能生长，而只导入质粒的细菌能生长目的基因的插入破坏了四环素抗性基因，重组质粒上只含有氨苄青霉素抗性基因，而质粒上含氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，在含有四环素的培养基上，导入重组质粒的细菌不能生长，而只导入质粒的细菌能生长。
（4）干扰素在体外保存非常困难，如果将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，在-70℃条件下可以保存半年。实现这一转变需要直接对基因基因进行修饰或改造，这属于蛋白质工程的范畴。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】基因的选择性表达；酶B、酶C；质粒与目的基因自身环化；防止同时破坏质粒中的两个标记基因；氨苄青霉素；四环素；目的基因的插入破坏了四环素抗性基因，重组质粒上只含有氨苄青霉素抗性基因，而质粒上含氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，在含有四环素的培养基上，导入重组质粒的细菌不能生长，而只导入质粒的细菌能生长；基因
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：27引用：3难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
