斑马鱼是一种模式动物，体外受精发育，胚胎透明、便于观察，可用于水质监测、基因功能分析以及药物毒性与安全性评价等。
（1）由于人类活动产生的生活污水日益增多，大量未经处理的污水直接排入河流、湖泊会引起水体

富营养化

富营养化

，导致藻类大量繁殖形成水华。取水样喂养斑马鱼，可用斑马鱼每周的体重和死亡率等指标监测水体污染程度。
（2）为了研究某基因在斑马鱼血管发育过程中的分子调控机制，用DNA连接酶将该基因连接到质粒载体形成

重组DNA分子

重组DNA分子

，导入到大肠杆菌菌株DH5α中。为了能够连接上该目的基因、并有利于获得含该目的基因的DH5α阳性细胞克隆，质粒载体应含有

限制性核酸内切酶的识别序列、抗生素抗性基因

限制性核酸内切酶的识别序列、抗生素抗性基因

（答出2点即可）。提取质粒后，采用

显微注射

显微注射

法，将该基因导入到斑马鱼受精卵细胞中，培养并观察转基因斑马鱼胚胎血管的发育情况。
（3）为了获取大量斑马鱼胚胎细胞用于药物筛选，可用

胰蛋白酶

胰蛋白酶

分散斑马鱼囊胚的内细胞团，取分散细胞作为初始材料进行

原代

原代

培养。培养瓶中添加成纤维细胞作为

饲养层细胞

饲养层细胞

，以提高斑马鱼胚胎细胞克隆的形成率。