拟南芥(2N=10)属于十字花科植物,自花传粉,被誉为“植物界的果蝇”,广泛应用于植物遗传学研究。拟南芥细胞中存在某种转录因子能够明显提高其他基因的表达水平。研究人员将从拟南芥细胞中获取的转录因子转移到大豆细胞内,并使其过量表达,发现大豆中油酸和亚油酸的含量显著提高。图中限制酶EcoRV的酶切位点为-GAT↓ATC-。

(1)质粒Po具有氨苄青霉素抗性基因(amp')和四环素抗性基因(tetr),对其进行切割时应该注意 所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中,以便筛选重组质粒。
(2)P3质粒导入受体细胞通常使用农杆菌转化法,若受体细胞能够表现氨苄青霉素抗性,不能不能(填“能”或“不能”)说明目的基因已成功导入受体细胞,并说出理由:有可能是导入了不含目的基因的质粒PO有可能是导入了不含目的基因的质粒PO。
(3)受体细胞能够培育出转基因大豆植株的原因是 植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性。
(4)为了获得大量的目的基因,可以采用PCR技术进行扩增,PCR技术依据的原理是 DNA半保留复制DNA半保留复制。PCR过程每次循环分为3步,其中温度最低的一步是 复性复性PCR扩增完成后,常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物。在凝胶中DNA分子的迁移速率与 凝胶的浓度凝胶的浓度等有关。
(5)利用PCR技术,在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基,就可以在目的基因中带来定点突变,据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质,该过程属于 蛋白质工程蛋白质工程(填工程技术)的范畴。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】所选的限制酶所识别的序列不能同时存在于氨青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中;不能;有可能是导入了不含目的基因的质粒PO;植物细胞具有全能性;DNA半保留复制;复性;凝胶的浓度;蛋白质工程
【解答】
【点评】
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