野生酵母菌不能利用粗纤维，科学家将β-甘露聚糖酶基因导入猪肠道野生酵母菌细胞中，β-甘露聚糖酶基因编码的酶能将粗纤维分解成单糖，可被猪吸收利用，提高了饲料的利用率。请回答下列问题：
（1）若要使β-甘露聚糖酶基因在野生酵母菌细胞中表达，需要通过质粒载体连接β-甘露聚糖酶基因，而不能直接将β-露聚糖酶基因导入野生酵母菌细胞，其原因是获取的β-甘露聚糖酶基因上没有其表达所需要的 启动子和终止子启动子和终止子。
（2）与细胞内DNA复制不同，对β-甘露聚糖酶基因进行PCR扩增时，β-甘露聚糖酶基因的解旋是通过 高温（或90～95℃）高温（或90～95℃）（填条件）来实现的。PCR技术扩增β-甘露聚糖酶基因的前提是 要有一段已知β-甘露聚糖酶基因的核苷酸序列要有一段已知β-甘露聚糖酶基因的核苷酸序列，以便合成引物。PCR技术所利用的原料是 dNTP（或dCTP、dATP、dGTP、dTTP）dNTP（或dCTP、dATP、dGTP、dTTP）。
（3）将β-露聚糖酶基因与质粒载体构建成基因表达载体的目的是 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。
（4）用两种限制性核酸内切酶切割质粒后，再用DNA连接酶将目的基因与载体通过 磷酸二酯键磷酸二酯键（化学键）连接起来，构建基因表达载体并导入野生酵母菌细胞，利用 DNA分子杂交DNA分子杂交技术可检测β-露聚糖酶基因是否导入成功。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】启动子和终止子；高温（或90～95℃）；要有一段已知β-甘露聚糖酶基因的核苷酸序列；dNTP（或dCTP、dATP、dGTP、dTTP）；使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用；磷酸二酯键；DNA分子杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：2引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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