质粒A和质粒B各自有一个限制酶EcoRⅠ和限制酶BamHⅠ的识别位点，两种酶切割DNA产生的黏性末端不同。限制酶EcoRⅠ剪切位置旁边的数字表示其与限制酶BamHⅠ剪切部位之间的碱基对数（bp）。在含有质粒A和B的混合溶液中加入限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ，令其反应充分；然后，向剪切产物中加入DNA连接酶进行反应，再将其产物导入大肠杆菌中。（实验中不考虑：无ori质粒；拥有两个或以上ori的质粒；两个或以上质粒同时进入大肠杆菌；三个或以上DNA片段发生连接）请回答下列问题：

（1）只拥有质粒A的大肠杆菌

可以

可以

（填“可以”或“不可以”）在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳元素来源的培养基中生存？说明理由

质粒A含有氨苄青霉素抗性基因，使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素的培养基中生存，还含有半乳糖苷酶基因，使大肠杆菌合成半乳糖苷酶，并水解乳糖获得能量和碳源

质粒A含有氨苄青霉素抗性基因，使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素的培养基中生存，还含有半乳糖苷酶基因，使大肠杆菌合成半乳糖苷酶，并水解乳糖获得能量和碳源

。
（2）DNA连接酶进行反应后，存在

4

4

种大小不同的质粒，有

2

2

种质粒使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳源的培养基中生存。
（3）绿色荧光蛋白基因是标记基因一种，标记基因的功能是

供重组DNA的选择和鉴定

供重组DNA的选择和鉴定

。
（4）质粒导入大肠杆菌通常要用

Ca²⁺

Ca²⁺

处理，其作用是

使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态

使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态

。