透明质酸是一种应用广泛的粘性多糖，研究者欲改造枯草芽孢杆菌，通过添加诱导型启动子来协调菌体生长与产物生产之间的关系。
（1）为通过外源添加诱导剂来控制基因的表达，研究者选择了含木糖诱导型启动子的p质粒。透明质酸合成酶基因H以a链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5′→3′。为了使图1中酶切后的H基因按照正确的方向与p质粒连接，p质粒位点1和2所对应的酶分别是 Xho酶和Bsal酶Xho酶和Bsal酶。酶切后加入 DNA连接DNA连接酶使它们形成重组质粒。
（2）为协调菌体生长与产物生产之间的关系，将构建好的重组质粒转入经 Ca2+/CaCl2Ca2+/CaCl2处理后的枯草芽孢杆菌（D菌），在含 四环素/抗生素四环素/抗生素的培养基上筛选，得到枯草芽孢杆菌E（E菌）。进行工业培养时，培养基应选择 CC。
A．以木糖为唯一碳源的培养基
B．以蔗糖和木糖混合为碳源的培养基
C．以蔗糖为唯一碳源的培养基，接种2小时后添加木糖
D．以蔗糖为唯一碳源的培养基，培养结束后提取培养液，添加木糖
（3）质粒在细菌细胞中遗传不稳定、易丢失，研究者尝试将重组质粒进行改造，利用同源区段交叉互换的方法将H基因插入枯草芽孢杆菌的基因组mpr位点，得到整合型枯草芽孢杆菌F（F菌）。请在图2方框中画出F菌的基因组 
。
（4）对三种枯草芽孢杆菌进行培养，结果如图3，请选择适宜工业发酵生产的菌种并阐明理由 F菌；F菌比E菌生长迅速，透明质酸产量高，培养基中不需要添加四环素，H基因整合到细菌DNA上，不易丢失F菌；F菌比E菌生长迅速，透明质酸产量高，培养基中不需要添加四环素，H基因整合到细菌DNA上，不易丢失。
【答案】Xho酶和Bsal酶；DNA连接；Ca2+/CaCl2；四环素/抗生素；C；；F菌；F菌比E菌生长迅速，透明质酸产量高，培养基中不需要添加四环素，H基因整合到细菌DNA上，不易丢失
；F菌；F菌比E菌生长迅速，透明质酸产量高，培养基中不需要添加四环素，H基因整合到细菌DNA上，不易丢失【解答】
【点评】
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发布：2024/12/19 14:30:2组卷：27引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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