经由食物摄取过量生物胺会引起头痛、胃肠道不适和过敏等不良反应，严重时甚至危及生命，因此必须对食品中生物胺的含量进行减控。微生物来源的多铜氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程规模化生产重组MCO在食品工业中具有广泛用途。我国科研人员采用PCR技术获得发酵乳杆菌的MCO基因，然后转入大肠杆菌中实现了高效表达。
（1）通过上述基因工程技术获取目标产物，涉及如下步骤，则合理的操作步骤排序是 ②⑤④①③②⑤④①③（填写下列编号）。
①筛选和鉴定含目的基因的受体细胞
②选用合适的方法获取目的基因
③借助发酵工程规模化生产目标蛋白
④目的基因导入受体细胞
⑤目的基因和运载体重组构建表达载体
（2）在PCR过程中，引物的功能是 ABAB。
A．启动DNA复制
B．规定扩增区间
C．解旋DNA双链
D．充当复制模板
（3）为获得目的基因MCO（图甲灰色表示的序列），正确设计的PCR引物应为图甲中的 BCBC。
（4）获取目的基因后，需要和载体重组导入受体细胞。载体的化学本质是 DNADNA（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常规PCR的每一轮扩增反应中，温度随时间的变化顺序是图乙中的 AA。
（6）若目的基因MCO经限制酶切开后呈图丙中图2所示的末端，那么载体质粒pCLY15（图丙中图1）需用 KpnIKpnI和 XmaIXmaI切开，才能与MCO片段高效连接。
（7）下列实验操作中，能有效鉴别载体质粒pCLY15空载还是“满载”的是 ACAC。
A．从抗药性克隆中提取质粒DNA，用合适的限制酶切割
B．在选择培养基中添加X-gal试剂，以克隆的颜色进行鉴别
C．从抗药性克隆中提取质粒DNA，以此为模板进行PCR检测
D．将Ap抗性克隆转移至含Tc（四环素）的平板上，根据大肠杆菌生长与否加以鉴别
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】②⑤④①③；AB；BC；DNA；A；KpnI；XmaI；AC
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/11/14 4:30:2组卷：30引用：3难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
相关试卷
