异烟肼(isoniazid)又名雷米封(rimifon),是吡哆醇的结构类似物或代谢拮抗物。科研人员为了定向培育抗异烟肼的吡哆醇高产酵母菌突变株,采用梯度平板法进行了如下实验:
①在灭菌后的培养皿中加入10mL融化的普通培养基,皿底斜放(一边垫起),待凝(如图1);
②待培养基凝固后将培养皿放平,倒上第二层含适当浓度的异烟肼的培养基(10mL),这样便得到异烟肼含量从一边到另一边逐渐升高的梯度平板(如图2);
③用移液管移取经诱变处理后的酵母菌细胞悬液0.1mL到梯度平板上,进行涂布;
④将平板倒置于22℃恒温培养箱中培养一段时间,可观察到梯度平板上酵母菌的生长情况(如图3)。

据分析回答:
(1)从作用来看,本研究使用的培养基属于选择选择培养基,为了使其能够凝固,在配制时通常需要在培养基中加入琼脂琼脂。
(2)步骤①中培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌,步骤③中移液管常用的灭菌方法是干热灭菌干热灭菌。
(3)步骤③中,滴加到梯度平板上的酵母菌细胞悬液一般不超过0.1mL的原因是培养基表面的酵母菌细胞悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果培养基表面的酵母菌细胞悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果。
(4)步骤④中,培养基上接种后将平板进行倒置培养的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基,恒温培养箱的温度控制在22℃左右,其主要目的是为酵母菌细胞的生长、繁殖提供适宜的温度为酵母菌细胞的生长、繁殖提供适宜的温度。
(5)根据实验结果推测,图3抗性菌落主要位于图2 中BB端,其具有抗药性的主要原因是酵母菌合成更高浓度的吡哆醇,以克服异烟肼的竞争性抑制酵母菌合成更高浓度的吡哆醇,以克服异烟肼的竞争性抑制。
【答案】选择;琼脂;高压蒸汽灭菌;干热灭菌;培养基表面的酵母菌细胞悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果;防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基;为酵母菌细胞的生长、繁殖提供适宜的温度;B;酵母菌合成更高浓度的吡哆醇,以克服异烟肼的竞争性抑制
【解答】
【点评】
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A.细胞膜 B.核糖体 C.拟核 D.荚膜
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①缺少
②具有
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表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
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