人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原,经加工后形成两条肽链(A链和B链)的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法:“AB”法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段,利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因,表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据图分析并回答下列问题:

(1)“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列,原因是 一种氨基酸可能对应多种密码子一种氨基酸可能对应多种密码子。“BCA”法是利用人体 胰岛B胰岛B细胞中的mRNA,再由mRNA经 逆转录逆转录得到的胰岛素基因,“AB和BCA”“AB和BCA”(填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”)法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。
(2)如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接,在设计PCR引物时可将限制酶 XhoⅠ和MunⅠXhoⅠ和MunⅠ的识别序列添加在PCR两种引物的 5′5′(填“3′”或“5′”)端,PCR开始后,与a链相结合的引物上添加的是限制酶 MunⅠMunⅠ的识别序列。若计划用1个胰岛素基因为模板获得m(m大于2)个胰岛素基因,则消耗的引物总量是 2m-22m-2个。
(3)β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。经钙离子处理大肠杆菌后,与重组质粒混合培养一段时间,将大肠杆菌接种到添加了 氨苄青霉素和X-gal氨苄青霉素和X-gal的培养基上筛选出 白白色的菌落即为工程菌种。
(4)科学家利用蛋白质工程技术,研制出了易吸收、起效快的赖脯胰岛素,获得赖脯胰岛素基因的途径是:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
【考点】基因工程的操作过程综合;蛋白质工程基本原理.
【答案】一种氨基酸可能对应多种密码子;胰岛B;逆转录;“AB和BCA”;XhoⅠ和MunⅠ;5′;MunⅠ;2m-2;氨苄青霉素和X-gal;白;设计预期的蛋白质结构
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:44引用:2难度:0.5
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