枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。

（1）为筛选能高效降解蛋白质的枯草芽孢杆菌菌株，分别将浸过不同菌株的提取液（a～e）及无菌水（f）的无菌圆纸片置于平板培养基表面，在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1。请回答问题：
①在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、

蛋白质

蛋白质

。培养枯草芽孢杆菌时，常用摇床进行振荡培养，目的是

增加培养液中的溶氧量，并使菌株与培养液充分接触，有利于目的菌的生长繁殖

增加培养液中的溶氧量，并使菌株与培养液充分接触，有利于目的菌的生长繁殖

。
②菌株提取液a～e中降解蛋白质效率最高的是

a

a

（用字母回答），判断依据是

a周围的透明圈最大，说明其产生的蛋白酶数量多或活性高

a周围的透明圈最大，说明其产生的蛋白酶数量多或活性高

。
（2）分离蛋白质的原理是根据蛋白质的各种特性，如蛋白质分子的

形状和大小

形状和大小

、所带电荷的

性质和多少

性质和多少

以及溶解度、吸附性、对其他分子亲和力等，可用来分离不同种类蛋白质，从而得到目的蛋白酶。蛋白质的肽链之间可通过二硫键维持稳定。已知不同的多肽产物可因相对分子质量不同而以电泳方式分离。图2是一个分析蛋白酶分子的电泳结果图，“一”代表没加还原剂，“十”代表加还原剂，还原剂可打断二硫键，“M”代表某些已知相对分子质量的蛋白质或多肽，M右侧的数字代表这些蛋白质或多肽的相对分子质量。图3中的“-”代表二硫键，根据图2结果可推知图3中最能代表该蛋白质结构的是

C

C

。
（3）科研工作者们打算研究枯草芽孢杆菌对养殖水体的净化作用。在制作固定化枯草芽孢杆菌时，充分混合均匀的枯草芽孢杆菌溶液可以在饱和的

CaCl₂

CaCl₂

溶液中形成凝胶珠若形成凝胶珠颜色过浅则说明

固定化酵母细胞数目较少

固定化酵母细胞数目较少

。枯草芽孢杆菌的固定化技术是包埋法，而制备固定化酶则不宜用此方法，原因是

酶分子很小，容易从包埋材料中漏出

酶分子很小，容易从包埋材料中漏出

。